- 殺稻瘟菌素S （滅瘟素）（抗生素）
- 型號(hào)：FS0016
- 報(bào)價(jià)：580
- 地區(qū)：上海市
- 殺稻瘟菌素S （滅瘟素）（抗生素）一種來(lái)自Streptomyces griseochromogenes的核苷類抗生素，通過(guò)干擾核糖體中肽鍵的形成來(lái)特異性地抑制原核和真核生物的蛋白質(zhì)合成。Blasticidin S用于篩選攜帶有bsr或BSD耐受基因的轉(zhuǎn)染細(xì)胞。殺稻瘟菌素具有快速而強(qiáng)效的作用模式，很低的抗生素濃度便能導(dǎo)致細(xì)胞迅速死亡。CAS：3513-03-9
- 021-34600120
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
| 產(chǎn)品貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 報(bào)價(jià)（元） |
| FS0016-1ML | 殺稻瘟菌素S （滅瘟素10 mg/ml）（抗生素） | 1ml | 580.00 |
| FS0016-5ML | 殺稻瘟菌素S （滅瘟素10 mg/ml）（抗生素） | 5ml | 2150.00 |
| FS0016-10ML | 殺稻瘟菌素S （滅瘟素10 mg/ml）（抗生素） | 10ml | 3900.00 |
產(chǎn)品屬性：
CAS：3513-03-9
分子式：C17H27CIN8O5
分子量：458.9
純度：＞95%(HPLC)
儲(chǔ)存條件：-20℃
別名：滅稻瘟素
產(chǎn)品應(yīng)用：
抗性基因：目前已經(jīng)克隆和測(cè)序的殺稻瘟菌素耐受基因有3種，一種是分離自產(chǎn)生菌Streptoverticillum sp.的乙酰基轉(zhuǎn)移酶基因bls，另外兩種是脫氨酶基因，包括從Bacillus cereus 中分離的bsr和從Aspergillus terreus 中分離的BSD 基因。Bsr和 BSD基因是常用的篩選標(biāo)志，用于哺乳動(dòng)物和植物細(xì)胞的基因轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)，也可用于E.Coli。
應(yīng)用濃度：
1)Escherichia coli
E. coli對(duì)Blasticidin S的敏感性稍差，但是轉(zhuǎn)化子對(duì)Blasticidin S具有耐受性，可以用低鹽LB培養(yǎng)基(pH 8)進(jìn)行篩選，濃度范圍為50-100 μg/ml Blasticidin S。高的pH值可以提高Blasticidin S的活性。
2)哺乳動(dòng)物細(xì)胞
哺乳動(dòng)物細(xì)胞中Blasticidin S的工作濃度范圍在1-50 μg/ml。初次實(shí)驗(yàn)建議通過(guò)滅殺曲線來(lái)確定佳使用濃度。
- 25-100 µg/ml in bacteria
- 1-30 µg/ml in mammalian cells
操作步驟(哺乳動(dòng)物穩(wěn)轉(zhuǎn)株篩選)
Blasticidin S通常使用濃度為10 μg/ml。攜帶bsr或BSD基因的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，在含有Blasticidin S的正常生長(zhǎng)培養(yǎng)基中孵育，用于篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株。
(1)轉(zhuǎn)染后48h，用含有適宜濃度Blasticidin S的新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞傳代(注：細(xì)胞處于活躍分裂期時(shí)抗生素工作好。細(xì)胞密度太高，抗生素效率降低。細(xì)胞分盤時(shí)覆蓋率不超過(guò)25%);
(2)每3-4天去除培養(yǎng)基，加入含抗生素的新鮮培養(yǎng)基;
(3)7天后檢測(cè)細(xì)胞集落形成。根據(jù)宿主細(xì)胞種類和轉(zhuǎn)染/篩選效率，集落形成可能需要增加一周或更久。
(4)轉(zhuǎn)移5-10個(gè)耐受克隆到35mm細(xì)胞盤中，加入選擇培養(yǎng)基維持培養(yǎng)7天。隨后用細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)進(jìn)行檢測(cè)。
儲(chǔ)存條件：-20℃，避免反復(fù)凍融，有效期一年。
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